1. Авторы разработки:

Бакунина И.Ю., к.х.н., с.н.с. лаборатории химии ферментов ТИБОХ ДВО РАН (lec@piboc.dvo.ru), тел.: 231-07-05;

Балабанова Л.А., к.б.н., н.с. лаборатории морской биохимии ТИБОХ ДВО РАН (balaban@piboc.dvo.ru) тел. 2310703;

Елякова Л.А., д.х.н., профессор, научный консультант лаборатории химии ферментов ТИБОХ ДВО РАН, (lec@piboc.dvo.ru), тел.: 231-07-05,

Звягинцева Т.Н., д.х.н., профессор, заведующий лаборатории химии ферментов ТИБОХ ДВО РАН, (zvyag@piboc.dvo.ru) тел. 2310705;

Михайлов В.В., член -корр. РАН, д.б.н., профессор, зав. лаб. микробиологи ТИБОХ ДВО РАН (mikhailov@piboc.dvo.ru), тел. 2311168,

Недашковская О.И., д.б.н., в.н.с. лаб. микробиологи ТИБОХ ДВО РАН, (olganedashkovska@piboc.dvo.ru), тел. 2311168,

Рассказов В.А., к.б.н., заведующий лаборатории морской биохимии ТИБОХ ДВО РАН (raskaz@piboc.dvo.ru), тел. 2311635.

Организация-разработчик:

Тихоокеанский институт биоорганической химии ДВО РАН,

690022, проспект 100-летия Владивостока, 159,

piboc@eastnet.febras.ru, факс:(423) 2314050.

2. Основные области применения и перспективные отрасли промышленности, в которых возможно эффективное внедрение данной разработки:

α-N-Ацетилгалактозаминидаза и α-галактозидаза из морских бактерий, действующие при нейтральных значениях рН, могут быть предложены для конверсии эритроцитов крови человека групп крови А, В и АВ в группу крови О в биотехнологии получения 'универсальной' крови. 'Универсальная' кровь группы O используется наиболее часто в чрезвычайных ситуациях, когда невозможно по ряду причин определить группу крови реципиента, для педиатрических переливаний, и, особенно, в случаях, когда необходима кровь необычных или редких фенотипов.

3. Техническое описание, содержащее основные принципы, технологии, технико-экономические параметры, не раскрывающие "ноу-хау" разработки, описание продукта/услуги.

Для получения 'универсальной' крови планируется использовать рекомбинантные ферменты. Для получения рекомбинантных белков будут использоваться методы молекулярной генетики, генной и белковой инженерии, такие как полимеразная цепная реакция, конструирование гибридных молекул ДНК in vitro, химерогенез, секвенирование ДНК, гетерологическая экспрессия генов, а также традиционные биохимические методы - ионообменная и аффинная хроматографии, ДСН-ПААГ электрофорез, высокоэффективная жидкостная хроматография, газожидкостная хроматография. Предполагается проведение ряда клинических испытаний. В результате полученные рекомбинантные белки будут предложены в качестве коммерческих препаратов для целевого использования.

4. Преимущества предлагаемого проекта, разработки, технологии по сравнению с известными.

α-N-ацетилгалактозаминидаза из морской бактерии Flavobacterium sp. проявляет максимальную активность при рН 7,0-8,0, остается стабильной до 37°С. Фермент не вызывает неспецифической агглютинации эритроцитов и их гемолиза, и в отличие от известных аналогов модифицирует эритроциты как подгруппы А₂, так и А₁ в эритроциты группы О.

α-Галактозидаза из морской бактерии Pseudoalteromonas sp. проявляет максимальную активность при рН 6,7-7,7. При 20°С фермент стабилен более суток. α-Галактозидаза отщепляет галактозу от мелибиозы (Galαl,6Glс), дисахарида Galαl,3Gal и трисахарида Galαl,3(Fucαl,2)Gal. Последний является концевым структурным элементом В-антигена на эритроцитах группы крови В. Результаты иммунологического исследования эритроцитов показали, что В-антигены полностью трансформируются в Н-антигены в отсутствии агрегации эритроцитов и их гемолиза. Фермент не проявляет активности к А- и Н-антигенам. В отличие от известных аналогов, ферменты из морских бактерий полностью удовлетворяют требованиям для использования в биотехнологии получения универсальной крови: комфортный интервал значений рН для жизнедеятельности эритроцитов, высокая удельная активность и требуемая специфичность, что делает трансфузию максимально эффективной и экономически выгодной.

5. Наличие собственных запатентованных решений:

Патент РФ № 2077577 по способу выделения и очистки щелочной фосфатазы из морской бактерии Halomonas marina.

Патент N 2113479 Российская Федерация, МКИ⁶ С 12 N 9/40//(С 12 N 9/40, C 12 R 1:01). Штамм бактерий Pseudoalteromonas sp. - продуцент α-галактозидазы / Недашковская О.И, Бакунина И.Ю., Сова В.В., Михайлов В.В., Елякова Л.А., Кульман Р.А. - № 97107819/13; Заявл. 23.04.97; Опубл. 20.06.98, Бюл. № 17. - 7 с.

Патент N 2141526 Российская Федерация, МКИ⁶ С 12 N 9/40//(С 12 N 9/40, C 12 R 1:20). Штамм бактерий Flavobacterium sp. - продуцент α-N-ацетилглюкозаминидазы / Недашковская О.И., Бакунина И.Ю., Кульман Р.А., Лихошерстов Л.М., Мартынова М.И., Михайлов В.В., Елякова Л.А. - № 98111673/13; Заявл. 17.06.98; Опубл. 20.11.99., Бюл. № 32. - 10 с.

6. Стадия, на которой находится разработка: ОКР.

7. Схема коммерциализации разработки: создание производства.

8. Требуемый размер финансирования для успешной коммерциалтзации:

100000000 (сто миллионов) рублей.